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文献引用

王德富，杨锋，崔丽艳，等.栽培黑果枸杞活性成分生物合成关键基因克隆及表达分析［J］.山西农业大学学报（自然科学版），，40（4）：27-35.

WangDF，YangF，CuiLY，etal.CloningandexpressionanalysisofgenesintheactiveingredientbiosynthesispathwaysofcultivatedLyciumruthenicum［J］.JournalofShanxiAgriculturalUniversity（NaturalScienceEdition），，40（4）：27-35.

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作者简介

王德富，副教授，硕士生导师，研究方向：药用植物规范化栽培。3

摘要

［目的］本文旨在对不同生长期花色苷和原花青素含量及关键酶基因表达分析，为从分子生物学水平确定黑果枸杞最佳采收期提供理论依据，同时对生物合成途径中关键酶基因进行克隆，为揭示黑果枸杞花色苷和原花青素的生物合成机制以及利用基因工程技术进行黑果枸杞靶向育种奠定基础。［方法］分别利用pH示差法和香草醛-盐酸法测定不同时期黑果枸杞花色苷和原花青素含量；通过RT-PCR技术扩增4种关键酶基因LrDFR、LrANS、LrLAR和LrANR的cDNA全长序列，并进行生物信息学分析；利用qRT-PCR分析关键酶基因在黑果枸杞果实不同发育时期的表达情况。［结果］黑果枸杞果实花色苷在黑果成熟期含量最高（6.08mg·g-1DW），原花青素在半紫半黑果期含量最高（22.3mg·g-1DW）；克隆得到4种关键酶基因的序列全长分别为bp、bp、bp和bp，分别编码、、和aa的蛋白质，序列分析表明4种基因所编码氨基酸均具有所属蛋白家族的典型特征。［结论］花色苷在黑果成熟期含量最高，原花青素在半紫半黑果期含量最高，且随着果实发育和花色苷含量的增加，LrDFR和LrANS表达水平也逐渐上升，而LrLAR和LrANR则呈先上升后下降的表达模式；当黑果枸杞用于原花青素提取时，可适当提前采收期；研究结果为从分子生物学水平确定黑果枸杞最佳采收期提供理论依据，也为黑果枸杞花色苷与原花青素生物合成机制的揭示奠定基础。

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关键词

黑果枸杞；花色苷；原花青素；基因克隆；表达分析

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文章重要图表

山西农业大学学报（自然科学版）重点栏目1.农学●方法方法导向型论文，描述一种研究方法，目的是使这种研究方法得到更广泛的应用。方法可以是原创的，也可以是在别的领域里已经发展成熟，但还未在其他领域推广或得到重视的。面向广大作者征稿，期望能将最先进的方法与技术引入到农业中来并得以推广，促进农业的发展。比如：基因组编辑技术及其在作物遗传育种中的作用，全基因组选择育种，表型组学研究进展等。2.杂粮作物研究得益于山西复杂的地形、多样的气候和悠久的农耕历史，山西省杂粮资源丰富。谷子、荞麦、燕麦、马铃薯等杂粮作物的研究也是我校的优势研究项目。为突出地域特色，形成我刊的特色栏目，面向广大作者征稿。网址：